北京華盛譜信儀器有限責(zé)任公司

方法：采用氣相色譜內(nèi)標(biāo)法，以萘為內(nèi)標(biāo)，測定八角茴香油中茴香腦的含量。結(jié)果：茴香腦在4．12—32．96btg范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，--y-~加樣回收率為96．28％，RSD=1．o9％。結(jié)論：氣相色譜內(nèi)標(biāo)法簡便、準(zhǔn)確，重現(xiàn)性好，可作為茴香油的質(zhì)量控制方法之一。

八角茴香油為木蘭科植物八角茴香Illicium vcrttm Hook．f．的新鮮枝葉或成熟果實(shí)經(jīng)水蒸汽蒸餾得到的揮發(fā)油，具有芳香調(diào)味及健胃作用，是廣西的特產(chǎn)中藥材?！吨袊幍洹?000年版一部收載的八角茴香油標(biāo)準(zhǔn)無含量測定項(xiàng)目【1】。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，八角茴香油中含茴香腦、草蒿腦、茴香醛等成分【2－5】，其中茴香腦是主要有效成分【6，7】 ，目前茴香腦的含量測定多采用氣相色譜法【2－5】，而用氣相色譜內(nèi)標(biāo)法測定八角茴香油中茴香腦的含量未見報(bào)道。由于氣相色譜法進(jìn)樣量少，采用內(nèi)標(biāo)法可減少誤差，為提高方法的重現(xiàn)性，本文建立了氣相色譜內(nèi)標(biāo)法測定八角茴香油中茴香腦含量的方法，結(jié)果較為滿意，可作為該藥材質(zhì)量控制的方法。
 
    1 試藥
    茴香腦對照品:含量99％ (GC)]；萘(分析純，含量99％)；醋酸乙酯(分析純)；八角茴香油對照藥材(由中國藥品生物制品檢定所提供，批號1545—200001)；八角茴香油樣品(桂林市維威制藥有限公司產(chǎn)品，批號：030501、030502、030503、 030601、030602、030603、030604、030701、030702、030703)。
    2 方法與結(jié)果
    2．1 色譜條件填充色譜柱：以聚乙二醇(PEG)一20M和硅酮(OV—l7)為固定液，涂布濃度分別為10％和2％，涂布后的載體以7：3的比例(重量比)裝入同一柱內(nèi)(PEG在進(jìn)樣口端)，長度為2m；程序升溫：柱子初始溫度100℃，保持5min；以4℃／min升至140℃，保持5min，以l0℃／min升至200℃ ，保持5min；進(jìn)樣口溫度：250℃；檢測器：FID，溫度250％；載氣N 2：60ml／min；助燃?xì)鈇ir：50ml／min；燃?xì)釮2：60ml／min；進(jìn)樣量：lμl。在上述色譜條件下分別進(jìn)樣測定，結(jié)果表明理論板數(shù)按茴香腦峰計(jì)算不低于10 000，茴香腦峰和內(nèi)標(biāo)物萘均與相鄰組分色譜峰達(dá)到*分離，分離度大于1.5， 茴香腦保留時(shí)間約為15min， 內(nèi)標(biāo)物萘保留時(shí)間約為13min。
 
    2．2 對照品溶液的制備 精密稱取茴香對照品2．06g于25ml量瓶中，以醋酸乙酯溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為茴香腦對照品溶液。
    2．3 內(nèi)標(biāo)溶液的制備 精密稱取萘1．26g于25 ml量瓶中， 以醋酸乙酯溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為內(nèi)標(biāo)溶液。
    2．4 供試品溶液的制備 取八角茴香油0．18g，精密稱定，置10ml量瓶中，精密加入內(nèi)標(biāo)溶液2ml，加醋酸乙酯稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

    2．5 線性關(guān)系的考察 分別精密吸取上述對照品溶液0．5、1、2、3、4ml，分別置10ml量瓶中，各精密加入內(nèi)標(biāo)溶液2ml，以醋酸乙酯稀釋至刻度，搖勻，按上述色譜條件，各進(jìn)樣lμl，進(jìn)行測定。以茴香腦峰面積積分值和萘峰面積積分值的比值y對茴香腦進(jìn)樣量 進(jìn)行回歸分析，得回歸方程：Y：0．07509X一0．005997．r=1．0000。表明茴香腦進(jìn)樣量在4．12—32．96μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。
    2．6 校正因子的測定 精密稱取萘1．25g，置25ml量瓶中，加醋酸乙酯溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為內(nèi)標(biāo)溶液。精密稱取茴香腦對照品2．00g，置25ml量瓶中，加醋酸乙酯溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為茴香腦對照品溶液。精密量取上述對照溶液和內(nèi)標(biāo)溶液各2ml，置10ml量瓶中，加醋酸乙酯稀釋至刻度，搖勻，作為標(biāo)準(zhǔn)溶液。(即lμl含茴香腦16μg；含萘10μg)。取lμl注入氣相色譜儀，連續(xù)進(jìn)樣6次，按平均峰面積計(jì)算校正因子，結(jié)果校正因子為1．3154，RSD=0．15％(n=6)。

    2．7 精密度與重現(xiàn)性試驗(yàn) 取同一供試品溶液，連續(xù)重復(fù)進(jìn)樣6次，以茴香腦峰面積積分值對萘峰面積積分值的比值計(jì)算相對標(biāo)準(zhǔn)偏差，測得平均值為1．2372， RSD =1．64％ 。精密稱取同一批樣品6份，品溶液，依法進(jìn)樣測定，以茴香腦的百分含量(g／g)計(jì)算相對標(biāo)準(zhǔn)偏差，平均含量為90．60％ ， RSD =0．15％ 。
    2．8 加樣回收率試驗(yàn) 精密稱取已測知含量的樣品(平均含量90．72％)0．09g于10ml量瓶中；分別精密加入茴香腦對照品溶液lml及內(nèi)標(biāo)溶液2ml，以醋酸乙酯稀釋至刻度，搖勻。精密吸取1 l進(jìn)樣測定，計(jì)算回收率，平均回收率96．28％ ，RSD=1．09％(n=5)。
    2．9 樣品測定按“校正因子測定及供試品溶液的制備"項(xiàng)下操作制備校正因子及樣品溶液，然后分別精密吸取校正因子溶液1 l連續(xù)進(jìn)樣3次，測定校正因子；精密吸取供試品溶液ltal，進(jìn)樣測定2次，以內(nèi)標(biāo)法計(jì)算樣品中茴香腦的百分含量(g／g)，各約0．18g，按2．4項(xiàng)方法制備供試 結(jié)果見表1。表1 樣品含量測定結(jié)果 (n=2)